聚合物微觀機(jī)構(gòu)會(huì)影響聚合物的機(jī)械和傳輸特性，進(jìn)而決定了材料的耐久性以及對(duì)風(fēng)化、冷熱和光照的耐受性，因此聚合物微觀結(jié)構(gòu)的精確表征非常重要。

各類(lèi)聚合物，無(wú)論是柔性、硬質(zhì)、天然還是合成，都是如此。

Cryo-BIB-SEM可對(duì)表面完好的大尺寸低溫穩(wěn)定樣本的微孔進(jìn)行高清晰成像和化學(xué)分析。在上一篇報(bào)告中，使用Cryo-BIB-SEM研究了鋰離子電池電極在干燥過(guò)程中的微觀結(jié)構(gòu)^[1]。本報(bào)告中使用cryo-BIB-SEM表征了天然聚合物，包括木頭和水果蔬菜的表皮。

如前文所述，需要以亞微米級(jí)清晰度精準(zhǔn)確定柔性聚合物的微觀機(jī)構(gòu)。然而，很少有方法能夠在如此高分辨率下對(duì)這種柔性樣本進(jìn)行表征。另外，由于冷凍斷裂工藝制備的柔性聚合物樣本的表面過(guò)于粗糙，使用SEM或能量色散譜（EDS）進(jìn)行定量分析時(shí)，僅能夠準(zhǔn)確研究很小一部分的表面區(qū)域。而且有機(jī)材料往往會(huì)發(fā)生膨脹收縮，使用SEM進(jìn)行樣本制備和測(cè)量時(shí)，尤其是對(duì)于高水分含量的材料，通常很難在材料的原生狀態(tài)下進(jìn)行分析。微型計(jì)算機(jī)斷層成像（μCT）和SEM低溫聚焦離子束銑削（cryo-FIB-SEM）等方法的分辨率則通常過(guò)低或獲得的結(jié)果不具代表性。

本應(yīng)用注意事項(xiàng)介紹了使用cryo-BIB-SEM在高分辨率（亞微米級(jí)）下對(duì)柔性、易損天然聚合物（木材和番茄表皮）的微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征的過(guò)程。

Cryo-BIB可制備具有大平面區(qū)域的冷凍穩(wěn)定橫截面（可達(dá)4 mm2）。樣本制備中包含快速冷卻（淬火）步驟，可形成整齊的聚合物切口并大大降低造成斷裂、變形等損壞的風(fēng)險(xiǎn)。使用液氮-雪泥對(duì)樣本進(jìn)行淬火，然后將樣本快速轉(zhuǎn)移至一個(gè)溫度保持LN2水平的低溫冷卻階段（圖1a）^[2]。使用金剛石鋸在鈦(Ti)掩模上方幾十納米處切割低溫冷卻樣本，鈦掩膜在后續(xù)的濺射鍍膜過(guò)程中遮蔽樣本。使用cryo-BIB氬(Ar)離子束銑削，制備平整的大橫截面。

接下來(lái)，根據(jù)所需的信息類(lèi)型，可以使用兩種制備和成像方案，可以是EDS成分?jǐn)?shù)據(jù)或使用SEM獲得的精細(xì)結(jié)構(gòu)的高清晰圖像。在第一個(gè)方案中（圖1b），樣本經(jīng)濺射鍍膜處理以方便EDS/SEM分析并提供各階段紋理和成分的信息。在第二個(gè)方案中，樣本未經(jīng)過(guò)鍍膜處理，以便于滲入多孔表面中的水升華。這樣一來(lái)，之前被水隱藏的樣本微觀結(jié)構(gòu)便可以顯現(xiàn)出來(lái)。

使用徠卡顯微系統(tǒng)的EM TIC 3X離子束銑削系統(tǒng)對(duì)木材和番茄皮（天然聚合物）樣本進(jìn)行冷凍寬幅離子束（cryo-BIB）銑削。將經(jīng)BIB銑削的樣本放進(jìn)SEM（Supra 55，蔡司）之前，首先使用徠卡顯微系統(tǒng)的EM ACE600鍍膜機(jī)的濺射、碳蒸發(fā)和電子束蒸發(fā)配置對(duì)樣本濺射鍍膜一層薄薄的鎢（W）。鎢層可防止不導(dǎo)電樣本被電子束輻射時(shí)充電。

從一個(gè)新鮮番茄（圖2a）上切一小塊皮，然后按照?qǐng)D1中的工作流程進(jìn)行制備，并按照方案2進(jìn)行分析。番茄皮含有大量水分，微觀結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，因此是評(píng)估樣本制備過(guò)程中因形成冰晶而發(fā)生斷裂的可能性的理想材料。

圖2b中顯示了一個(gè)番茄皮的橫截面，在橫截面的上部可以看到一小片鈦掩膜，掩膜上積聚了一些“濺射灰塵"。番茄細(xì)胞的精細(xì)結(jié)構(gòu)清晰可見(jiàn)，細(xì)胞形狀非常類(lèi)似于之前光學(xué)顯微鏡觀察文獻(xiàn)中報(bào)告的形狀^[3]。cryo-BIB-SEM方法的清晰度更高，可以分析易損微觀結(jié)構(gòu)的精細(xì)細(xì)節(jié)（圖2c）。

低溫冷卻和切割過(guò)程中未發(fā)現(xiàn)造成任何損傷，這說(shuō)明cryo-BIB-SEM方法可以為柔性易損天然聚合物分析制備無(wú)損傷、缺陷的樣本。

Cryo-BIB-SEM成像可揭示松木（樟子松）的細(xì)胞和微觀形態(tài)。寬幅離子束銑削方法制備的細(xì)胞壁表面，上面沒(méi)有切片機(jī)切割等制備方法造成的偽影。EDS提供了不同木材相位的成分，例如細(xì)胞膜質(zhì)中的碳（C）和因細(xì)胞中含有大量的水而存在的氧氣（O）^[4]。